黃曲霉毒素(aflatoxins,AFT)是一類結構和理化性質相似的真菌次級代謝物,具有強致癌性和免疫抑制性。該類毒素廣泛存在于花生及其制品、玉米及其制品、乳與乳制品、動物飼料、棉花籽、杏仁、開心果等食品中,黃曲霉毒素不僅直接對人體及動物造成毒害,還可以通過食物鏈從動物體轉內移到人體內造成二次危害。黃曲霉毒素的檢測方法有多種,主要有薄層層析法、快速微柱法、酶聯免疫法、電化學免疫傳感器法、高效液相色譜法和液相色譜串聯質譜法等。
黃曲霉毒素親和柱分為柱壓型(帶玻璃試管)和推桿型(針筒式)兩種,以極性、非極性及離子交換等基團組成填充劑,可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白質類等雜質,毒素不被吸附而直接通過,其操作更為簡便,不需要進行活化、淋洗和洗脫操作,只需要直接上樣,30秒鐘即可完成整個凈化過程,可同時凈化多種毒素,降低檢測成本,有效提高檢測效率,穩定性強,回收率高,適用于食品、糧食飼料、飲料、中藥材等多種復雜樣品。
親和柱利用抗原抗體特異性可逆結合的原理,將抗體與凝膠共價結合,然后填充柱子。將樣品提取溶液過免疫親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,再用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原。其提純效率很高,適用于各類復雜樣品包括食品、飼料等多種基質。整個純化過程30分鐘左右。
黃曲霉毒素親和柱使用注意事項:
?。?)黃曲霉毒素對人體有害,應戴手套操作。凡接觸到標樣的玻璃器皿都要用5%次氯酸鈉浸泡過夜。
?。?)不要使用過有效期的免疫親和柱。
?。?)免疫親和柱應在2-8℃保存。不要冷凍。
?。?)使用前,兔疫親和柱雷至少提前半小時回溫至室溫(25℃左右)。
(5)按以上的提取過程,樣品通過柱子的實際體積等于1g原物質,分析方法的檢測限可以通過改變進柱的樣品體積而改變。